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酵母双杂交（膜系统）服务
泰克生物致力于为客户提供高质量的酵母双杂交（膜系统）服务，即MbY2H服务，包括但不限于已知蛋白的互作验证、酵母双杂交（膜系统）文库的构建与筛选、基于酵母双杂交原理的蛋白自身的转录激活验证、膜蛋白与膜蛋白/胞质蛋白的互作验证等。泰克生物在酵母双杂交方面拥有多年的项目开发经验和心得，能够为客户提供各种定制化的各类酵母双杂交cDNA文库，包括但不限于动物组织、植物组织、细胞等各类种属样本的cDNA酵母双杂交（膜系统）文库构建服务。
DUAL membrane 系统（DUAL membrane system）是基于分离的泛素（split-ubiquitin）介导的膜蛋白酵母双杂交系统，将泛素基因分成两部分分别表达，即诱饵蛋白融合泛素的N端部分（NubI），猎物蛋白与泛素的C端部分（Cub）、LexA蛋白（可启动核内报告基因表达）和VP16融合表达，若诱饵蛋白和猎物蛋白两个蛋白之间存在相互作用，则泛素的N端部分（NubI）和C端部分（Cub）靠近结合，如此被UBPs识别从而启动下游报告基因的表达。基于这一原理，泰克生物建立了基于酵母双杂交（膜系统）的膜蛋白互作验证平台、膜蛋白和胞质蛋白互作验证平台、酵母双杂交cDNA文库构建与筛选平台（可发现众多天然的、潜在的互作蛋白）。泰克生物构建的酵母双杂交cDNA文库/多肽文库的库容可达10^6-10^7，文库多样性、插入率均可达90%以上，满足各类客户对于酵母双杂交（膜系统）文库的质量要求。同时，泰克生物还能提供酵母双杂交（膜系统）文库构建与筛选的配套的下游表达验证和亲和力测定验证等一站式技术服务，客户只需要提供具体的靶蛋白序列信息、需要构建的文库种类以及样本信息，泰克生物的科学家均能够根据客户的需求进行合理的方案设计和个性化定制，助力客户的科研项目。
█ 酵母双杂交（膜系统）服务
泰克生物建立了完善的酵母双杂交（膜系统）体系，能够提供各种高质量的定制化的酵母双杂交（膜系统）服务，包括但不限于各类种属样本cDNA文库构建与筛选、已知膜蛋白互作验证、已知膜蛋白与胞质蛋白互作验证、未知互作蛋白验证服务等，以满足不同客户的科研需求。酵母双杂交（膜系统）文库构建服务流程如图1所示。
图1酵母双杂交（膜系统）文库构建服务流程
█ 服务内容和周期
步骤 | 服务内容 | 周期 |
酵母双杂交（膜系统）文库构建 | 1) 总RNA提取； 2) 高保真RT-PCR制备cDNA； 3) 载体构建与转化：载体构建（cDNA连接酵母双杂交载体：融合Cub-LexA-VP16）+电击转化酵母菌株； 4) 涂板挑取阳性克隆+阳性克隆PCR扩增（跑胶鉴定）+文库NGS测序； 5) 交付：酵母文库质粒1管（>300ug），酵母文库甘油菌3-5ml，实验报告 | 4-6周 |
酵母双杂交（膜系统）文库筛选 | 1) 自激活验证； 2) 诱饵质粒与文库质粒共转酵母菌株； 3) 蓝白斑筛选； 4) 挑单克隆测序； 5) 交付：实验报告、测序原始数据 | 7-9周 |
█ 服务优势
-- 多种种属样本可选：新鲜的动物组织样本、植物组织样本、细胞样本或各类样本的total RNA（需保证RNA不降解）等
-- 多种酵母双杂交（膜系统）文库可选：各类种属样本的cDNA酵母双杂交（膜系统）文库构建
-- 酵母双杂交（膜系统）技术成熟：酵母双杂交文库库容可达10^6-10^7，插入率和多样性均>90%
-- 高标准交付：酵母双杂交（膜系统）文库质量保证，为客户的下游实验提供有力支持
-- 实验记录可追溯：文库QC质控标准（库容、多样性、插入率），中英文实验报告，原始实验记录
-- 可提供一系列配套的下游实验服务，文库筛选、蛋白表达验证以及亲和力验证等
-- 一对一个性化方案定制，根据客户需求设计最佳的构建和筛选方案（如：文库构建方法的选择（包括但不限于SMART技术、Gateway技术等）、载体构建设计、文库筛选及自激活验证方案设计等），满足各类客户的科研项目需求
-- 一站式服务：从方案设计、RNA提取、cDNA制备、载体构建、菌株转化及筛选验证等一站式技术服务
酵母双杂交（膜系统）服务常见问题解答
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