中文

抗体制备与检测服务平台

询价与订购

  • 姓名*

  • 电话号码*

  • 电子邮件*

  • 产品名称*

  • 描述*

重组片段抗体定制服务

抗体/抗体片段与抗原产生特异性和高效结合性,在生化、治疗和诊断等领域发挥不可替代的作用。传统生产单克隆抗体的杂交瘤技术,由于其自身研发周期比较长,生产的成本相对较高,已经成为大规模、快速生产抗体/抗体片段的瓶颈。近年来,随着基因重组和生物工程技术的不断进步,高通量筛选和大规模生产抗体/抗体片段成为现实。

抗原结合片段 (Fab) 是抗体上与抗原结合的区域。 它包含每条重链和轻链的一个恒定区和一个可变区。 只有重链和轻链的可变区融合在一起形成单链可变片段(scFv),其大小只有Fab片段的一半,但保留了原有的特异性。另一种小抗体片段,单域抗体,又称域抗体、VHH、VNAR或sdAb,是一种由单个单体可变抗体结构域组成的抗体片段,缺少常规的轻链和重链的CH结构域。

泰克生物是一家专业的CRO服务提供商,能为我们的客户提供高质量的重组抗体表达服务,如scfv抗体片段、fab抗体片段、sdAb单域抗体、重链抗体等重组抗体构建和表达服务。另外,泰克生物目前在建的5000平米的GMP研究中心,能够为各类工业客户提供批量的重组抗体生产服务。

 

 抗体片段特性

 

重组片段抗体定制服务.jpg

 

 

抗体类型

组分

分子量(kDa)

化合价

半衰期(h)

Fab

VH+CH1+VL+CL

(轻重链利用二硫键连接)

50-55

单体

12-20

scFv

VH+VL

30

单体

2-4

sdAb

VHH

15

单体

0.5

Fc融合抗体

(抗体+CH2+CH3)*2

/

二聚体

/

di-scFv

scFv*2

60

二聚体

4-8


 抗体片段表达系统常用宿主

  

表达系统

菌株/细胞

特点

E.coli

BL21(DE3)

Ion-ompT,有效防止重组蛋白在胞内被水解

Rosetta(DE3)菌株含有pRARE质粒,能够提供AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA稀有密码子的tRNA,能够提供更加“通用”的蛋白质表达,
从而提升目的蛋白表达水平,该质粒具有氯霉素抗性。

Rosetta

哺乳动物细胞

CHO-S

是实验室常用的细胞系,作为贴壁和悬浮培养生长良好,生产率高,是大规模培养和GMP程序的理想选择;可进行许多翻译后修饰以获得生物仿制药,显示出卓越的生物相容性和药物活性;适用于无蛋白、无动物生产、无血清培养条件,并具有更好的稳定性和安全性。

CHO-K1

Freestyle 293F

是一类能够在无血清中高表达蛋白的野生型293细胞系,可以高效表达蛋白。

Expi 293F

具有高度可转染行,展示出较高的蛋白表达水平,相比标准的悬浮适应293细胞,表现出更快速的细胞生长和更高的培养存活率。


 抗体片段高表达策略


优化方式

特性

融合抗体

Fab 基因表达时,5'端带上细菌蛋白信号肽基因的Fd基因和L链基因,可在大肠杆菌细胞壁的周质腔内分泌型表达,形成完整的立体折叠。Fab片段保持了亲本抗体的抗原结合特异性和生物学活性。Fd基因片段和L链基因可以分别构建在两个载体上,然后共转染细胞,也可以构建在一个载体上转染细胞进行表达。

抗体序列本身的修饰

经定点突变可以改变抗体在某些关键位点的氨基酸,从而优化其稳定性,增强与抗原的亲和性,提高表达产量。

表达系统的选择

应考虑的因素有:实验设备、需表达抗体毒性、所需营养物、是否需要抗体高产率、抗体纯化工艺、生产成本、调控元件、生物安全方面等。

密码子优化

天然抗体/scFv来源于真核生物,其密码子很可能不为E.coli所偏好,使用偏好密码子能提高细胞对环境及抗体的适应性,减少重组抗体的错误折叠率。

条件优化

需要考虑的因素包括温度、培养基配比、pH、培养时间及诱导条件等。


 抗体表达服务内容

 

实验内容

交付

周期

基因合成&载体构建

1. 重组抗体

2. 表达载体

3. 克隆菌株

4. 实验报告

6-8周

质粒抽提

细胞转染&表达抗体

抗体纯化(SDS-PAGE)


 泰克可提供的服务

 

片段抗体构建和生产服务


片段抗体包括Fab抗体、scFv和VHH抗体(驼源纳米抗体)等。客户可直接提供Fab、scFv或VHH序列,交由泰克生物进行重组表达并获得高纯度产品。如客户仅有靶抗原信息,则可委托泰克生物进行动物免疫并筛选scFv、VHH等抗体。

 

重组抗体293F/CHO细胞表达服务


全套Gibco无血清哺乳细胞培养,适用于科学家对天然构象蛋白的体外重组表达需求,如糖基化修饰,磷酸化修饰等。为客户提供的全套服务满足GMP-like体系,包括细胞种子库来源文件记录体系、细胞种子批检定,动物源成分的质控,标准化细胞培养与转化操作流程,全套GE提供的纯化填料和设备等准则进行生产的重组蛋白。

 

 服务优势

 

-- 详细的实验设计和论证:包含稀有密码子分析,抗体序列分析,表达系统的选择,表达载体构建方案,抗体修饰等

-- 多种标记抗体表达:His标签融合表达,同位素标记表达、生物素标记表达

-- 多个种属的重组抗体制备:包括人源,鼠源,兔源,羊源,犬源,骆驼源,羊驼源,牛源等

-- 抗体修饰控制:糖基化修饰和磷酸化修饰多寡控制

-- 多重表达模式:稳定表达和瞬时表达

-- 配套的哺乳体系高表达载体和各种规格的放大体系

-- 低内毒素水平:LAL检测法<0.1EU/ug

-- 完整的文件追溯体系,保证您的产品所有材料、试剂和制备信息可追溯


推荐服务

RECOMMENDED SERVICES
*
*
*
*

×

重组片段抗体定制服务常见问题解答

  • 重组片段抗体在宿主系统中的表达水平较低,导致产量不足。

    优化表达载体的构建,包括选择适当的启动子、信号序列、选择合适的宿主系统等;优化培养条件,如温度、培养基成分、氧气供应等,提高表达水平;考虑使用融合标签或增强剂,提高抗体的表达效率。

  • 重组片段抗体的结构或活性受到影响,导致其功能不完整或无法正常表达。

    对抗体的结构进行优化设计,确保其正确折叠和功能;通过结构预测和分析,评估抗体的活性和稳定性;进行功能性验证,确认抗体的活性和特异性。

  • 选择的重组片段抗体可能不适合特定的研究需求,影响后续应用。

    根据研究目的和需求选择合适的抗体片段,如Fab片段、scFv片段等;进行前期筛选和评估,选择最适合的抗体片段;考虑使用多种抗体片段的组合,以提高抗体的效果和应用范围。

立即咨询重组片段抗体定制服务

*
*
*
*
*
*
*
• 详细了解客户信息保护,请访问隐私政策
• 如果您对我们的技术服务有任何疑问,可发邮件至info@tekbiotech.com或拔打电话022-2297-6311详细咨询。

体验泰克生物-酵母展示服务专家的可靠服务,请订阅: