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抗体亲和力成熟服务

抗体的结合亲和力是决定抗体药物疗效和剂量的关键参数之一。目前,提高抗体结合亲和力的方法主要集中在位点突变、CDR重排、DNA重组等方面。通过我们有效的抗体亲和力成熟技术,我们可以快速发现抗体域中的关键氨基酸位点。这反过来又增加了抗体的结合亲和力,至少达到 nM 水平。


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█ 服务内容


内容

交付

周期

DNA改组

抗体序列及测序报告

优化抗体的 1-3 个

完整分析报告 (PDF)

24-28

文库构建与筛选

抗体生产与验证


█ 基于噬菌体的选择的好处

 

噬菌体选择非常通用,可以定制以获得所需的抗原特异性或亲和力参数。选项包括

(1) 与阴性对照抗原竞争以对交叉反应结合剂进行阴性选择

(2) 通过以较低浓度包被抗原或通过改变孵育和洗涤时间进行基于解离速率的动力学选择

(3) 抗原构象特异性选择与重组和基于细胞的抗原兼容

(4) 最后噬菌体病毒在 80°C 下稳定,允许选择热稳定、高表达的克隆

我们在噬菌体淘选后进行快速筛选,选择后,产生数百个随机挑选的克隆,并从细菌上清液中筛选出可溶性 Fab。在进入耗时的 IgG 生产阶段之前,以高通量筛选先导候选物可节省大量时间和资源。除了全序列分析外,还可以通过ELISA、流式细胞术、功能测定和 BLI以高通量筛选重组或基于细胞的蛋白质。

 

█ 服务优势

  

-- 通过 DNA 改组进行有效的随机突变

-- 成熟的噬菌体展示平台,确保高质量的抗体亲和力成熟服务

-- 亲和力评估



推荐服务

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抗体亲和力成熟服务常见问题解答

  • 双特异性抗体在宿主系统中的表达水平较低,导致产量不足。

    优化表达载体的构建,包括选择适当的启动子、信号序列、选择合适的宿主系统等;优化培养条件,如温度、培养基成分、氧气供应等,提高表达水平;考虑使用增强剂或表达辅助剂,提高抗体的表达效率。

  • 双特异性抗体的结构或活性受到影响,导致其功能不完整或无法正常表达。

    对抗体结构进行优化设计,确保其正确的构象和功能;通过结构预测和分析,评估双特异性抗体的活性和稳定性;进行功能性验证,确认抗体的活性和特异性。

  • 抗原的选择和设计可能影响双特异性抗体的结合效率和特异性。

    优化抗原的设计和表达,确保其与双特异性抗体的结合效率和特异性;进行前期抗原评估和筛选,选择最适合的抗原;考虑使用亲和改良或结构优化等方法,提高抗体与抗原的结合效率和特异性。

  • 双特异性抗体的纯化和稳定性可能受到影响,影响后续应用的可靠性。

    优化纯化方法和步骤,选择适当的纯化柱、层析条件和洗脱缓冲液,提高纯化效率;进行稳定性测试,评估抗体的稳定性和保存条件;考虑使用添加剂或保护剂,提高抗体的稳定性和保存期限。

  • 抗体的亲和力不足,导致其与靶标结合能力较弱。

    使用多种技术进行亲和力成熟,如串联突变、DNA乙基化、RNA适配体技术等;利用筛选库进行高通量筛选,选取具有高亲和力的突变体;进行结构分析,探索提高亲和力的潜在机制。

  • 抗体在成熟过程中可能产生非特异性结合,与非目标蛋白结合。

    进行特异性筛选,筛选出对目标蛋白具有高亲和力、低非特异性结合的突变体;优化选择筛选条件,提高筛选的特异性;利用结合位点信息进行设计,减少非特异性结合。

  • 抗体的结构稳定性可能受到影响,影响其在生理条件下的稳定性。

    通过构建突变库,筛选出结构更稳定的突变体;利用蛋白工程技术对抗体框架进行优化,增强其结构稳定性;进行结构分析,了解突变对结构稳定性的影响。

立即咨询抗体亲和力成熟服务

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