噬菌体展示的应用（上篇）-噬菌体展示技术专题-泰克生物—酵母与噬菌体展示CRO，纳米抗体与抗体药物开发专家

噬菌体展示的应用（上篇）

应用一：抗体药物开发

①　困难靶点抗体开发

一般来说疾病治疗的思路是先找到靶点，再针对靶点设计抗体，但是事实上不是所有的靶点都是“天选之子”，有些靶点高度保守、毒性强、是膜蛋白、具有多重跨膜结构、非免疫原型或者缺乏已知的功能性表位等原因导致传统方法无法得到（如杂交瘤）。而phagepro tech?可以绕过免疫进行体外筛选，直接合成抗体库，不依赖动物体内免疫反应，所以这可以解决毒性靶点、高度保守靶点以及非免疫原型靶点；针对难以纯化的靶点，噬菌体展示文库可以进行细胞淘选和DNA淘选；噬菌体文库筛选可以进行“定向进化”，通过定点突变或者错配，对任何途径得到的初始抗体进行亲和力成熟和稳定性优化。

②　抗体人源化

传统的抗体人源化，是直接将鼠源的互补决定区CDR移到人源抗体框架，但是经常会导致亲和力下降。那么phagepro tech?在其中起到什么改进作用呢？

第一种方法是首先通过杂交瘤技术获得单克隆抗体，将该抗体CDR3去转移至人源抗体框架，随后对CDR3区进行随机突变形成噬菌体文库，用靶抗原进行多轮筛选，做定向进化，得到亲和力成熟的人源化抗体。

第二种方法可以说几乎跳过转移CDR区的步骤，是在得到鼠单抗后，分析其与抗原结合的关键序列，将关键序列嵌入至人源抗体库，随后通过靶抗原进行筛选。因为骨架和大部分序列都来自于人抗体，这种类型的抗体具有鼠单克隆抗体的特异性，又在人类中保持亲和力。

抗体人源化改造-1.png

图一抗体人源化改造 ^[1]

应用二：蛋白质-蛋白质相互作用研究

①　寻找模拟表位（疫苗设计核心）

模拟表位是已经通过杂交瘤技术得到中和抗体，但是想要知道该抗体与病毒结合的具体位置，以设计广谱疫苗。通俗来讲就是运用该中和抗体筛选噬菌体随机肽库，当噬菌体上的短肽序列与病毒某一段高度相似时，这些短肽就是模拟表位，可以设计聚焦于该短肽的疫苗。

和上述寻找靶点的抗体核心目标不同，但常常在研发中形成闭环。找到核心中和表位→利用表位筛选人抗体库→得到治疗性抗体；通过phagepro tech?或其他方法得到中和抗体→表位定位法技术获得模拟表位→设计广谱疫苗

确定模拟表位到实际应用-2.png

图二确定模拟表位到实际应用^[2]

②　寻找伴侣蛋白

在生命活动中没有一个蛋白是“单打独斗”的，找到关键蛋白对了解调控网络至关重要，phagepro tech?能精准识别出特定蛋白的“伴侣蛋白”。简单来说构建一个噬菌体展示cDNA文库，将已知的、想要研究其功能的蛋白固定和文库孵育，筛选出结合噬菌体分析测序确定伴侣蛋白。目标蛋白可以是酶、信号蛋白、受体胞内域、病毒蛋白等任何感兴趣蛋白。利用这种方法可以直接获得伴侣蛋白基因、具有高灵敏性、可以进行功能性筛选。

泰克生物科技（天津）有限公司基于噬菌体展示技术，建立了完善的靶向抗体药物发现平台，能够为全球的科学家提供高质量VHH中和单克隆抗体开发服务，包括但不限于基于GPCR靶点、肿瘤靶点、各类疾病靶点等的药物单抗的前期开发与验证服务，提供从项目方案设计到成药性评估等一站式技术服务，满足各类客户对于药物单抗开发的需求。

参考文献

[1] Chen HC,Pan YL,Chen Y, et al. Monoclonal Antibodies as a Therapeutic Strategy against Multidrug-Resistant Bacterial Infections in a Post-COVID-19 Era. Life (Basel). 2024;14 (2):.

[2] Luzar J,?trukelj B,Lunder M. Phage display peptide libraries in molecular allergology: from epitope mapping to mimotope-based immunotherapy. Allergy. 2016;71 (11):1526-1532.