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重组抗体表达服务
泰克生物专注于为客户开发高质量的靶向性药物抗体。为帮助客户进行高质量的成药性评价,搭建了以哺乳细胞为核心的体外重组表达平台,可为客户提供包含序列分析、linker设计、融合标签设计,高表达载体设计构建、表达方案设计优化、重组表达条件优化、抗体纯化等高质量的一站式重组抗体制备服务。
█ 抗体重组表达服务
为了配合高质量的抗体发现服务,泰克生物建立了一套完整的抗体体外哺乳重组表达和纯化及严格的QC控制体系。泰克生物的科学家均来自生物制药企业,拥有多年的人用抗体类药物开发经验,在深入学习和了解GMP规则下,严格按照QC质量控制体系,ICH和GMP指导原则进行重组抗体类产品的开发,并为客户提供个体化且高质量的重组抗体定制服务。
步骤 | 具体服务内容 | 周期 |
Step1:基因克隆及载体构建 | 1) 扩增/鉴定基因片段或合成目的基因,插入哺乳动物细胞表达质粒 2) PCR及测序检测确定亚克隆基因 3) 交付:测序数据和实验方案 | 2-3周 |
Step2:重组抗体瞬时表达(小试) | 1) 重组质粒转染细胞(293F,CHO) :瞬时表达 2) SDS-PAGE和WB检测 3) 重组抗体纯化 4) 交付:表达载体1支,克隆菌株1支,重组抗体0.1-5mg,纯度>90%(SDS-PAGE) | 2-3周 |
表1:重组表达服务内容
█ 抗体重组表达服务类型
利用我们重组表达技术平台,泰克生物可为客户提供以下相关服务,如表2所示。
表2 重组抗体表达服务类型
重组蛋白哺乳表达服务 | |
VHH纳米抗体表达服务 |
泰克生物还可以为客户进行抗体人源化、CAR-T/CAR-NK先导序列设计及细胞杀伤验证等一站式技术服务,为客户的科研项目及药物抗体开发助力。
█ 服务优势
自主设计的高表达载体 | 一站式技术服务 | 周期快,成功率高 | 严格的QC质控体系 | 配套的体外验证服务 | 个性化定制服务 | 免疫次数少,效价高 |
答:重组抗体表达服务是一项基于基因重组技术的服务,用于生产具有特定抗原识别能力的抗体。通过将目标抗体的基因序列插入到适合的表达载体中,并转染到合适的宿主细胞(如大肠杆菌、哺乳动物细胞、酵母等)中,进行大规模生产。重组抗体通常具有高度的纯度和一致性,并可用于研究、诊断或作为治疗药物的候选。
答:重组抗体表达载体的选择依赖于多个因素,包括所需的抗体类型(如IgG、单克隆抗体、单域抗体等)、表达系统的兼容性、产量要求、抗体的折叠和功能活性等。常用的表达载体包括大肠杆菌表达系统、酵母表达系统和哺乳动物细胞系统。每种载体具有不同的优缺点,选择合适的载体能够优化抗体的表达水平和质量。
答:确保抗体正确折叠和活性的关键是选择合适的宿主系统和优化表达条件。在表达过程中,抗体的重链和轻链需正确配对并折叠形成活性二聚体。在一些表达系统中(如哺乳动物细胞),可以通过提供适当的辅助分子(如分子伴侣)来确保抗体的正确折叠。为了进一步验证抗体的功能性,通常需要通过抗原结合实验、流式细胞术等方法进行检测,确保表达的抗体具有良好的结合亲和力和生物学活性。
答:重组抗体的纯度和质量通常通过一系列分析方法进行评估。常见的检测手段包括:SDS-PAGE电泳(分析抗体的分子量和纯度)、西方印迹(Western Blot,确认抗体的特异性)、亲和层析(用于纯化抗体并确保其高纯度),以及ELISA(用于评估抗体的功能活性)。此外,质谱分析和氨基酸序列分析可用来验证抗体的结构和序列是否符合预期。每项检测都可以确保重组抗体符合质量标准。
答:在重组抗体表达过程中,常见的挑战包括低表达量、抗体折叠错误、产物聚集或沉淀、表达系统的选择不当等。大肠杆菌系统可能导致抗体无法正确折叠,产生不溶性的包涵体;哺乳动物细胞系统虽然能够产生正确折叠的抗体,但培养成本较高且产量相对较低。此外,抗体在表达过程中可能由于过度表达或不稳定的条件导致降解或失活,因此需要仔细优化表达和纯化条件。
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