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DNA免疫抗体制备服务
DNA免疫作为一种先进的技术方法能有效地诱导针对各种病原体的抗体和T细胞免疫应答,并且在免疫的动物或人血清中有效诱导高质量多克隆抗体应答,具有高度的构象特异性和高亲和力。与常规免疫方法不同,DNA免疫使宿主能够在体内产生具有常见转录后修饰的目的抗原,且该抗原较大限度地保持原始结构,绕过了耗时的免疫原(例如肽和重组蛋白)合成和纯化过程。DNA免疫特性有助于产生针对靶抗原自然构象的高亲和力抗体,这也是开发治疗性抗体的关键特征。同时,这种方法也是开发针对膜蛋白或其他具有挑战性抗原的抗体的理想方案。此外,DNA免疫也是免疫治疗及DNA 疫苗开发早期阶段的一种新工具。
图1 AAV病毒颗粒
泰克生物能够为客户提供多种抗原(包括但不限于PTM蛋白、细胞内蛋白、分泌蛋白)的DNA免疫抗体制备服务,基于杂交瘤的融合与筛选技术的抗体药物制备服务平台,泰克生物能够为客户提供一系列跟治疗性生物大分子免疫抗体制备相关的服务,包括但不限于VHH纳米抗体,scFv抗体,Fab抗体,DNA免疫抗体等制备服务。经过10年的发展,泰克生物建立了完善的杂交瘤的融合与筛选平台,具备为客户提供一系列基于杂交瘤的融合与筛选技术平台的高质量DNA免疫抗体制备服务的实力。此外,泰克生物拥有包括从基因合成与修饰、AAV载体构建、动物免疫、杂交瘤细胞的融合与筛选、抗体生产等一站式技术服务,并且有配套的抗原抗体结合分析、抗原抗体BLI亲和力测定、抗体细胞系验证、等许多下游配套服务,为客户的抗体药研发与生产提供有力的支撑。
█ DNA免疫的递送方式
常见的DNA免疫方式有基因枪,肌肉注射以及皮下直接注射DNA质粒,上述几种方法对于实验室的仪器设备要求很高,泰克生物基于AAV病毒递送方式开发了一套成熟的DNA免疫方法,能够保证为客户提供高质量的动物免疫服务,减少蛋白和细胞类免疫抗原的需求,从而节省客户的时间和费用。
传递方式 | 靶向抗原类型 |
基因枪 | 单次跨膜蛋白 |
胞内蛋白 | |
病毒外壳蛋白 | |
肌肉注射 | 细菌毒素 |
7次跨膜蛋白 | |
病毒外壳蛋白 | |
分泌蛋白,酶 | |
皮内注射 | 单次跨膜蛋白 |
细胞外基质和血浆 | |
糖蛋白 |
█ DNA免疫服务流程(以病毒为载体,羊驼纳米抗体开发为例)
(备注:客户只需要提供极少量的VLP蛋白或靶抗原表达细胞系即可验证DNA免疫效价)
服务项目 | 内容 | 周期 |
Step 1:DNA病毒合成 | 1) 基因模板合成,密码子优化,相关AAV载体构建 2) 病毒包装+QC控制 | 4-6周 |
Step2:动物免疫 | 1) 羊驼多次免疫 2) ELISA血清效价检测 | 8-10周 |
Step3:抗体筛选 | 1) 羊驼采血分离PBMC 2) 噬菌体文库或酵母抗体展示文库构建 3) 筛选获得VHH抗体序列 | 4-6周 |
Step4:抗体生产 | 1) 抗体重组表达 2) 抗体活性验证 | 3-4周 |
█ DNA免疫优势
-- DNA载体相比,mRNA更易获得,高质而廉价
-- 无需重组蛋白,无忧全长膜蛋白免疫,成本低(相比VLP)
-- 无需纯化VLP蛋白,适于离子通道蛋白和多次跨膜蛋白抗体开发
-- 免疫次数少,免疫效价高
█ 服务优势
客户定制化免疫方案,膜蛋白靶点免疫 特异性高,mRN免疫抗原纯度高(相比 细胞免疫) | 免疫经验丰富,保证型动物免疫效价 | 适合于离子通道蛋白,多次跨膜蛋白抗 体开发,案例多 | 提供详细的免疫计划周期表和免疫方案 |
答:DNA免疫抗体制备服务是一种基于DNA疫苗的抗体生产技术,通过将编码目标抗原的DNA序列注入动物体内,诱导动物体内的细胞合成该抗原,激发免疫系统产生特异性抗体。这种技术与传统的蛋白免疫方法不同,因为它使用的是DNA作为表达载体而非抗原本身。DNA免疫可以快速、有效地生成针对多种靶标的抗体,广泛应用于疫苗研发、抗体药物开发、肿瘤免疫治疗和疾病标志物筛选等领域。它特别适用于快速响应新出现的疾病病原体,并且具有高效、灵活、成本相对较低的优点。
答:DNA免疫抗体制备与传统的蛋白免疫方法相比具有几个明显的优势。首先,DNA免疫不需要提前合成大量的抗原蛋白,这大大减少了生产成本和时间,尤其是在需要快速响应新兴病原体时,DNA免疫能够显著缩短抗体开发周期。其次,DNA免疫通过直接在宿主细胞中表达抗原,避免了抗原蛋白在体外合成过程中可能出现的折叠问题,能够产生更加自然的免疫反应。此外,DNA免疫技术灵活性强,能够通过调整DNA序列的设计,快速针对不同的抗原进行优化,适用于多种抗原类型的免疫开发。最后,DNA免疫通常会诱导更广泛的免疫反应,包括抗体介导的免疫反应和T细胞介导的免疫反应,增加了多层次的免疫保护。
答:DNA免疫抗体制备服务具有多个优势。首先,DNA免疫提供了一个简便且低成本的抗体开发途径,省去了传统蛋白表达所需的时间和成本。其次,由于DNA免疫是基于基因表达的方式,抗原在宿主细胞中表达时不需要大量的纯化步骤,降低了生产过程中的复杂性和成本。此外,DNA免疫能够引发更全面的免疫反应,不仅可以激活B细胞产生抗体,还能够促进T细胞免疫反应,从而提供更强的免疫保护。由于DNA可以在动物体内持续表达,因此产生的免疫应答往往更为持久。此外,DNA免疫能够灵活调整抗原设计,适应多种不同靶标的免疫需求,具有较高的应用价值。
答:评估DNA免疫产生的抗体亲和力和特异性通常通过体外的免疫学方法来实现。最常见的方法是ELISA(酶联免疫吸附试验),通过检测抗体与靶标抗原之间的结合反应,可以评估抗体的亲和力。通常,在ELISA中,可以使用不同浓度的抗原来绘制抗体的结合曲线,从而计算其亲和力常数(Kd)。此外,还可以通过Western blot、免疫沉淀等方法验证抗体的特异性。为了进一步验证抗体的功能性,还可以使用流式细胞术、免疫组化等技术,评估抗体在细胞和组织中的特异性识别能力。通过这些实验,可以筛选出具有高亲和力、低交叉反应的优质抗体。
答:DNA免疫抗体制备服务在药物开发中具有显著的优势。首先,DNA免疫能够快速生成高亲和力的抗体,特别是在新型疾病或靶标的开发中,能够为药物研发提供快速响应。其次,DNA免疫可以直接在体内产生目标抗原,免疫反应更接近自然的生理状态,能够提高抗体的生物活性和稳定性。此外,DNA免疫通过降低蛋白生产和纯化的需求,显著减少了生产成本,同时具有较高的可扩展性和灵活性,可以根据不同需求定制化抗体。通过DNA免疫获得的抗体在临床前研究中能够有效评估其潜在的治疗作用,尤其在自体免疫疾病、感染性疾病和癌症等领域的药物开发中,能够提供更多的选择和机会。
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